無菌操作：整個細菌培養過程中，要確保無菌操作，避免外部污染，導致實驗失敗。

選擇合適的宿主菌株：選擇適當的宿主菌株，以確保較高的轉化(transformation)效率。

轉化方法：選擇合適的轉化方法，以提高轉化效率。

抗生素篩選：根據質體的抗生素抗性標記，使用相應抗生素的LB agar plate進行篩選。

單克隆挑選：挑選長在抗生素plate上的單克隆，以確保培養純化的轉化菌株。

初步放大培養：將單克隆接種至帶有相應抗生素的LB液體培養基中，進行初步放大培養。

菌液擴增：根據需要的質粒量，選擇適當的培養容器和培養基體積，進行菌液擴增。

監測菌液生長：監測菌液的生長情況，確保適當的生長時間。

Plasmid萃取：使用市售萃取純化試劑套組，按照操作手冊進行，並確定純度和濃度。

質體的鑒定：例如RE digestion，以確保質體正確。